EZsep™AL-N固相萃取柱應用於果汁中乙酰磺胺酸（suān）鉀的檢測

前言

國家市場監督管理總局，國家衛生健康委員會發布即將實施的食（shí）品（pǐn）中乙酰磺胺酸（suān）鉀的測（cè）定方法，該標準適用於乳（rǔ）及乳製品，冷凍飲品、水果製品、蔬菜製品、食用菌和藻類、豆（dòu）類製品、堅（jiān）果與（yǔ）籽類、糖果、糧食製（zhì）品、焙烤食品、調味品、飲料、酒類（lèi）、果凍中（zhōng）乙酰磺胺酸鉀的測定。

本實驗參考標準《GB 5009.140-2023 食品（pǐn）安全國（guó）家（jiā）標準 食品中乙酰磺（huáng）胺酸鉀的測定（dìng）》，使用EZsep™AL-N固相萃取柱進行（háng）樣品淨（jìng）化，高效液相色譜進行檢測，建立了一種對果（guǒ）汁中乙酰磺胺酸鉀的分析方法。

1、實（shí）驗過程

1.1 儀器（qì）與試劑

LC-20AD液相（xiàng）色譜儀，島津企業管理（中國）有限公（gōng）司（sī）；

MPREP-SPE08手動（dòng）固相萃取裝置（zhì），貨號：PZ0008，北京萊伯帕（pà）茲檢測科（kē）技有限公（gōng）司；

EZsep™AL-N固相萃取柱（500mg/6mL），貨號：PZ11423，北京萊伯帕茲檢測科（kē）技有限公（gōng）司；

冷凍離心機，GL-20G-Ⅱ，上海安亭科學儀器廠；

甲醇（色譜純），購自賽默飛世爾科技（中國）有限公司；

乙腈（色譜純），購自賽默飛世爾科技（jì）（中國）有限（xiàn）公司；

硫酸銨（分析純），購自國藥集團（tuán）化學試劑有限公司。

水中安賽蜜溶液標準物質，1000μg/mL，壇墨質檢科技（jì）股份有限公司。

1.2 工作液配（pèi）製

取水中安賽蜜標準溶液0.1mL，用水稀（xī）釋至10mL容量瓶中，配製成濃度為（wéi）10μg/mL的色素混標中（zhōng）間液。

分別移取10μg/mL的（de）色素混標（biāo）中間液0.01、0.02、0.05、0.1、0.2、0.5用水稀釋至1.0mL容量瓶中，得（dé）到濃度分別為（wéi）0.1、0.2、0.5、1、2、5μg/mL的標準（zhǔn）工作溶液。

1.3 實驗部分

準確稱取（qǔ）果汁試樣5.0g，置於50mL具塞離心管中，先（xiān）加入20mL水，渦旋1min,超聲提取20min，10000r/min離心5min，上（shàng）清液轉移至（zhì）50mL容（róng）量瓶中，再向離心（xīn）管中加水（shuǐ）20mL，混勻後超聲5min並離心。合（hé）並上清液,用水定容至刻（kè）度（dù），混勻。準確吸取提取（qǔ）液5mL，作為待（dài）淨（jìng）化液，待淨化。

將EZsep™AL-N固相萃取柱（500mg/6mL），貨號（hào）：PZ11423，分別以（yǐ）10mL乙腈、10mL水活化（huà）後，取待淨化（huà）液上樣，收集流出液。分別用2mL甲醇-乙腈-硫酸銨溶液(5+10+85)洗（xǐ）脫液（yè）洗滌固（gù）相萃取柱（zhù）2次，收集流出液，合並3次流出液，並用洗脫液定容至10mL，混勻，用PTFE微孔濾膜過濾，高效液相色譜測定。

1.4 LC分析

色譜柱：C18柱（250mm×4.6mm，5μm）；

流動（dòng）相：A:0.02mol/L硫酸銨（ǎn）溶液 B:甲醇（chún）；

流速：1.0mL/min；

檢測波長：227nm；

進樣量：10μL。

表1 流動相梯度洗脫表

2、       實驗結果

表2 加標（biāo）回收率結果

圖（tú）1 乙酰磺胺酸鉀標準色譜

圖2 樣品空（kōng）白（bái）標準色（sè）譜（pǔ）

圖3 樣品加標色譜圖

3、結（jié）論

本（běn）次實驗使用EZsep™AL-N固相萃取柱（500mg/6mL），貨號：PZ11423，北（běi）京萊伯（bó）帕茲檢測科技（jì）有限公司，對肉果汁中乙酰磺胺（àn）酸鉀進行測定，其加標（biāo）回收率範圍在89.4%~100.3%之間，RSD為4.7%。準確性和（hé）精密度均滿足GB 5009.140-2023要求，且實驗方（fāng）法穩定、可靠。

4、參考文獻

[1] GB 5009.140-2023 食品安全國家標準 食品（pǐn）中（zhōng）乙酰磺胺酸（suān）鉀的測定